【產(chǎn)品簡(jiǎn)介】
快速去基因組逆轉(zhuǎn)錄預(yù)混液（All-in-One First-Strand Synthesis MasterMix (with dsDNase)）是一款高效、便捷、減少污染的高質(zhì)量一鏈 cDNA 合成試劑盒，包含M-MLV GIII Reverse Transcriptase 及其反應(yīng) Buffer、RNA 酶抑制劑、dNTPs, Oligo(dT)20VN 和隨機(jī)引物等一鏈 cDNA 合成所需的所有組分，僅需加入 RNA 模板和水即可開(kāi)始反應(yīng)。使用該逆轉(zhuǎn)錄試劑盒獲得的 cDNA，下游可用于 qPCR、普通 PCR 等實(shí)驗(yàn)。
RNA 中存在基因組 DNA 污染，如果反轉(zhuǎn)錄前不做去除處理，下游進(jìn)行 qPCR 反應(yīng)時(shí)基因組 DNA 與 cDNA 會(huì)同時(shí)進(jìn)行擴(kuò)增，尤其是引物設(shè)計(jì)在同一外顯子上時(shí)。本試劑盒采用 dsDNase 高效去除基因組 DNA 污染，區(qū)別于常規(guī)的 DNase I，dsDNase 能夠特異性的消化雙鏈 DNA（dsDNA 以及 DNA 與 RNA 的雜合鏈），并且具有熱敏感性，可在高溫條件下快速不可逆地失活。與傳統(tǒng)使用 DNase I 去除基因組 DNA 污染的方法相比，dsDNase 無(wú)需額外加入 EDTA 進(jìn)行失活，不僅節(jié)省實(shí)驗(yàn)時(shí)間，而且降低了對(duì)逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的抑制。All-in-One First-Strand Synthesis MasterMix (with dsDNase) 作為升級(jí)后的一鏈 cDNA 合成試劑盒，15 分鐘內(nèi)最長(zhǎng)可獲得 12 kb cDNA?？梢罁?jù)基因組污染嚴(yán)重程度選擇采用去基因組 DNA 污染與反轉(zhuǎn)錄分開(kāi)進(jìn)行的操作方法，或者去基因組污染與反轉(zhuǎn)錄一步法進(jìn)行的操作方法。
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杭州浩克生物
