產品組分 | 200T | 500T | 1000T |
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試劑A:內源性過氧化物酶阻斷劑 | 20ml | 50ml | 100ml |
試劑B:POLY-HRP羊抗鼠二抗 | 20ml | 50ml | 100ml |
試劑C:DAB色原(20X) | 1ml | 5ml | 5ml |
試劑D:DAB緩沖液 | 20ml | 50ml | 100ml |
試劑E:一抗稀釋液 | 20ml | 50ml | 100ml |
試劑F:環(huán)保樹脂封片劑 | 10ml | 25ml | 50ml |
【產品簡介】
本試劑盒為高靈敏度的兩步法免疫組化試劑盒,適用于一抗來源為小鼠的抗體的后續(xù)顯色。 試劑盒中包含辣根過氧化物酶 HRP 偶聯標記的羊抗鼠 IgG,本產品適用于小鼠來源的一抗, 在 IHC、Western bLot 實驗中,HRP 標記的羊抗鼠二抗與小鼠來源一抗結合后,再與 DAB 反 應。DAB 是辣根過氧化物酶 (HRP) 的底物,在 HRP 的催化下,DAB 產生棕色沉淀顯色,實現 信號放大。
【儲存與運輸】
本試劑需低溫運輸,貯存于 4℃低溫環(huán)境,有效期一年
【使用方法】
常規(guī)脫蠟水化:
石蠟切片經常規(guī)脫蠟和水化。
抗原熱修復:
參照一抗說明書進行抗原修復。
DAB 工作液的配制:
按每毫升 DAB 緩沖液 (試劑 D) 中加入 50 μL DAB 色原 (試劑 C) (約 1 滴) 的比例配制 DAB 工作液,DAB 工作液應現配現用。配制好的 DAB 工作液需在 2 小時內使用,如出現沉淀, 使用前先混勻。
操作步驟:
1) 抗原修復完畢后自然冷卻的切片,用自來水清洗。
2) 除去切片上組織周圍的液體,用免疫組化筆圈定玻片上的待測組織區(qū)域并放入 PBST 緩 沖液中。
3) 取出切片,除去 PBST 緩沖液,滴加內源性過氧化物酶阻斷劑 (試劑 A) (視切片大小 以完全覆蓋切片組織為宜) ,于組織上孵育 10 分鐘,用 PBST 清洗切片。
4)除去 PBST 緩沖液,滴加 100μL 左右一抗工作液(視切片大小以完全覆蓋切片組織為宜), 于組織上進行孵育 (按照各自一抗說明書操作) 。一抗孵育完畢,用 PBST 清洗切片。
5) 除去 PBST 緩沖液,每張切片加酶標羊抗鼠/兔 IgG 聚合物 (試劑 B) 100μL 左右 (視切 片大小以完全覆蓋切片組織為宜) ,室溫下孵育 30 分鐘。PBST 緩沖液清洗切片。
6) 用預備好的 DAB 工作液進行顯色,每張切片加 100μL 左右 DAB 工作液 (視切片大小以 完全覆蓋切片組織為宜) ,顯色時間為 1-5 分鐘 (鏡檢控制染色) ,用自來水沖洗終止顯色反 應。
7) 需要時,使用蘇木素染液復染。
8) 切片經過脫水,透明,封片。
注:若將本試劑應用于自動檢測平臺,需根據實際情況確認使用條件。
【注意事項】
1.本免疫顯色試劑僅用于體外診斷,不作其他用途。
2.開始實驗前,應仔細閱讀此說明書。
3.請在試劑盒有效期內使用。
4.本免疫顯色試劑僅限有專業(yè)經驗或經專業(yè)培訓的人員使用。
5.若將本產品中的組分和其他公司的產品混合使用,染色過程中可能出現異常情況。
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