產(chǎn)品組分 | 200T | 500T | 1000T |
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試劑A:內(nèi)源性過(guò)氧化物酶阻斷劑 | 20ml | 50ml | 100ml |
試劑B:POLY-HRP羊抗兔二抗 | 20ml | 50ml | 100ml |
試劑C:DAB色原(20X) | 1ml | 5ml | 5ml |
試劑D:DAB緩沖液 | 20ml | 50ml | 100ml |
試劑E:一抗稀釋液 | 20ml | 50ml | 100ml |
試劑F:環(huán)保樹(shù)脂封片劑 | 10ml | 25ml | 50ml |
【產(chǎn)品簡(jiǎn)介】
本試劑盒為高靈敏度的兩步法免疫組化試劑盒,適用于一抗來(lái)源為兔的抗體的后續(xù)顯色。 試劑盒中包含辣根過(guò)氧化物酶 HRP 偶聯(lián)標(biāo)記的羊抗兔 IgG,本產(chǎn)品適用于兔來(lái)源的一抗, 在 IHC、Western bLot 實(shí)驗(yàn)中,HRP 標(biāo)記的羊抗兔二抗與兔來(lái)源一抗結(jié)合后,再與 DAB 反 應(yīng)。DAB 是辣根過(guò)氧化物酶 (HRP) 的底物,在 HRP 的催化下,DAB 產(chǎn)生棕色沉淀顯色,實(shí)現(xiàn) 信號(hào)放大。
【儲(chǔ)存與運(yùn)輸】
本試劑需低溫運(yùn)輸,貯存于 4℃低溫環(huán)境,有效期一年
【使用方法】
常規(guī)脫蠟水化:
石蠟切片經(jīng)常規(guī)脫蠟和水化。
抗原熱修復(fù):
參照一抗說(shuō)明書進(jìn)行抗原修復(fù)。
DAB 工作液的配制:
按每毫升 DAB 緩沖液 (試劑 D) 中加入 50 μL DAB 色原 (試劑 C) (約 1 滴) 的比例配制 DAB 工作液,DAB 工作液應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用。配制好的 DAB 工作液需在 2 小時(shí)內(nèi)使用,如出現(xiàn)沉淀, 使用前先混勻。
操作步驟:
1) 抗原修復(fù)完畢后自然冷卻的切片,用自來(lái)水清洗。
2) 除去切片上組織周圍的液體,用免疫組化筆圈定玻片上的待測(cè)組織區(qū)域并放入 PBST 緩 沖液中。
3) 取出切片,除去 PBST 緩沖液,滴加內(nèi)源性過(guò)氧化物酶阻斷劑 (試劑 A) (視切片大小 以完全覆蓋切片組織為宜) ,于組織上孵育 10 分鐘,用 PBST 清洗切片。
4)除去 PBST 緩沖液,滴加 100μL 左右一抗工作液(視切片大小以完全覆蓋切片組織為宜), 于組織上進(jìn)行孵育 (按照各自一抗說(shuō)明書操作) 。一抗孵育完畢,用 PBST 清洗切片。
5) 除去 PBST 緩沖液,每張切片加酶標(biāo)羊抗鼠/兔 IgG 聚合物 (試劑 B) 100μL 左右 (視切 片大小以完全覆蓋切片組織為宜) ,室溫下孵育 30 分鐘。PBST 緩沖液清洗切片。
6) 用預(yù)備好的 DAB 工作液進(jìn)行顯色,每張切片加 100μL 左右 DAB 工作液 (視切片大小以 完全覆蓋切片組織為宜) ,顯色時(shí)間為 1-5 分鐘 (鏡檢控制染色) ,用自來(lái)水沖洗終止顯色反 應(yīng)。
7) 需要時(shí),使用蘇木素染液復(fù)染。
8) 切片經(jīng)過(guò)脫水,透明,封片。
注:若將本試劑應(yīng)用于自動(dòng)檢測(cè)平臺(tái),需根據(jù)實(shí)際情況確認(rèn)使用條件。
【注意事項(xiàng)】
1.本免疫顯色試劑僅用于體外診斷,不作其他用途。
2.開(kāi)始實(shí)驗(yàn)前,應(yīng)仔細(xì)閱讀此說(shuō)明書。
3.請(qǐng)?jiān)谠噭┖杏行趦?nèi)使用。
4.本免疫顯色試劑僅限有專業(yè)經(jīng)驗(yàn)或經(jīng)專業(yè)培訓(xùn)的人員使用。
5.若將本產(chǎn)品中的組分和其他公司的產(chǎn)品混合使用,染色過(guò)程中可能出現(xiàn)異常情況。
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