簡介:
細胞爬片就是讓玻片浸在細胞培養(yǎng)基內(nèi),細胞在玻片上生長,主要用于免疫熒光,免疫組織化學(xué),冰凍切片,細胞涂片,原位雜交等。
實驗步驟:
【細胞爬片】步驟
1、將蓋玻片用洗潔劑清洗干凈,然后用自來水將洗潔劑沖洗干凈,再用純水沖洗三遍,75%的酒精中靜置浸泡10min。
2、用鑷子夾起蓋玻片在酒精燈上將酒精燒干,溫度不可太高。
3、將燒干的蓋玻片放在六孔板中,待冷卻后在6孔板中先加入2ml完全培養(yǎng)基,后加入細胞懸液,輕輕上下左右晃動,后置于37℃ 5% CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
注意事項:避免細胞靠近壁邊緣密度要高些,而處于中央玻片上爬的細胞數(shù)量相對較少。比較好的做法是將玻片放入孔板的孔內(nèi)后,加細胞懸液時只滴到玻片上,一直滴到液體布滿整個玻片又不會溢出玻片邊緣,放在培養(yǎng)箱里,等細胞貼壁后,取出,再滴加培養(yǎng)基布滿整個孔底,繼續(xù)培養(yǎng),這樣玻片上的細胞生長的密度就會很集中。
【細胞爬片的固定】
細胞爬片取出后,一般用PBS洗1-2遍,然后再做固定。常用4%多聚甲醛、95%乙醇等固定后,4℃保存。
客戶提供信息:
1.細胞英文名稱;
2.培養(yǎng)條件;
3.是否貼壁:貼壁細胞制作爬片,懸浮細胞只能做滴片或涂片;
4.實驗要求
樣本寄送須知:
1.活細胞:一定要不透氣方瓶寄,常溫;
2.凍存細胞:純干冰件,保證干冰充足
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