簡(jiǎn)介：

　　細(xì)胞爬片就是讓玻片浸在細(xì)胞培養(yǎng)基內(nèi)，細(xì)胞在玻片上生長(zhǎng)，主要用于免疫熒光，免疫組織化學(xué)，冰凍切片，細(xì)胞涂片，原位雜交等。

　　實(shí)驗(yàn)步驟：

　　【細(xì)胞爬片】步驟

　　1、將蓋玻片用洗潔劑清洗干凈，然后用自來(lái)水將洗潔劑沖洗干凈，再用純水沖洗三遍，75%的酒精中靜置浸泡10min。

　　2、用鑷子夾起蓋玻片在酒精燈上將酒精燒干，溫度不可太高。

　　3、將燒干的蓋玻片放在六孔板中，待冷卻后在6孔板中先加入2ml完全培養(yǎng)基，后加入細(xì)胞懸液，輕輕上下左右晃動(dòng)，后置于37℃ 5% CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

　　注意事項(xiàng)：避免細(xì)胞靠近壁邊緣密度要高些，而處于中央玻片上爬的細(xì)胞數(shù)量相對(duì)較少。比較好的做法是將玻片放入孔板的孔內(nèi)后，加細(xì)胞懸液時(shí)只滴到玻片上，一直滴到液體布滿整個(gè)玻片又不會(huì)溢出玻片邊緣，放在培養(yǎng)箱里，等細(xì)胞貼壁后，取出，再滴加培養(yǎng)基布滿整個(gè)孔底，繼續(xù)培養(yǎng)，這樣玻片上的細(xì)胞生長(zhǎng)的密度就會(huì)很集中。

　　【細(xì)胞爬片的固定】

　　細(xì)胞爬片取出后，一般用PBS洗1-2遍，然后再做固定。常用4%多聚甲醛、95%乙醇等固定后，4℃保存。

　　客戶提供信息：

　　1.細(xì)胞英文名稱;

　　2.培養(yǎng)條件;

　　3.是否貼壁：貼壁細(xì)胞制作爬片，懸浮細(xì)胞只能做滴片或涂片;

　　4.實(shí)驗(yàn)要求

　　樣本寄送須知：

　　1.活細(xì)胞：一定要不透氣方瓶寄，常溫;

　　2.凍存細(xì)胞：純干冰件，保證干冰充足