免疫組化 分子病理 實驗服務 免疫組化雙染（芯片）免疫組化 分子病理 實驗服務 價格￥300單位張貨號HKF2026品牌浩克 QQ53383090 咨詢購買 產(chǎn)品介紹產(chǎn)品參數(shù)資料下載 【產(chǎn)品信息】 產(chǎn)品名稱產(chǎn)品貨號規(guī)格價格免疫組化雙染（芯片）HKF2026張300元實驗原理免疫組化，是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應，即抗原與抗體特異性結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細胞內(nèi)抗原（多肽和蛋白質(zhì)），對其進行定位、定性及定量的研究，稱為免疫組織化學技術(IHC)或免疫細胞化學技術(ICC)。?實驗步驟1.?石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ12min-二甲苯Ⅱ12min?-無水乙醇Ⅰ6min-?95%酒精6min- 85%酒精6min，自來水洗2min。2.?抗原修復：組織切片置于盛滿抗原修復液EDTA(9.0)的修復盒中于微波爐內(nèi)進行抗原修復，中火8min至沸騰?；?br>8min再轉(zhuǎn)中低火7min，此過程中應防止緩沖液過度蒸發(fā)，切勿干片。自然冷卻后將玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。3.?阻斷內(nèi)源性過氧化物酶：切片加上3%的雙氧水，室溫孵育25min，將玻片置PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。4.?畫圈：用組化專用的組化筆沿著組織外圍輪廓畫一個與組織間隔3-4毫米的小圈，然后加入足量的PBS保證后續(xù)依次加入的封閉血清，一抗，二抗，以及顯色劑能完全覆蓋組織，而不沿著玻片流走。5.?血清封閉:在組化圈內(nèi)滴加3%BSA?均勻覆蓋組織，室溫封閉30min。6.?加一抗：輕輕甩掉封閉液，在切片上滴加按一定比例配好的一抗，切片平放于濕盒4°過夜孵育。7.?加二抗：玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。切片稍甩干后在圈內(nèi)滴加與超敏兔鼠通用二抗（HRP標記）覆蓋組織，室溫孵育50min。8.?顯色：玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。切片稍甩干后在圈內(nèi)滴加解凍的TY反應液反應20min，然后PBS洗三次，之后加入紅色顯色液工作液（PB:CU:紅色色原：AC=860:40:1:100），顯微鏡下控制顯色時間，陽性為紅色，純水沖洗切片終止顯色。(時間較長15min左右)，再重復2-7的操作步驟。9.?抗原修復：組織切片置于盛滿抗原修復液EDTA(9.0)的修復盒中于微波爐內(nèi)進行抗原修復，中火8min至沸騰?；?br>8min再轉(zhuǎn)中低火7min，此過程中應防止緩沖液過度蒸發(fā)，切勿干片。自然冷卻后將玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。10.?阻斷內(nèi)源性過氧化物酶：切片加上3%的雙氧水，室溫孵育25min，將玻片置PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。11.?畫圈：用組化專用的組化筆沿著組織外圍輪廓畫一個與組織間隔3-4毫米的小圈，然后加入足量的PBS保證后續(xù)依次加入的封閉血清，一抗，二抗，以及顯色劑能完全覆蓋組織，而不沿著玻片流走。12.?血清封閉:在組化圈內(nèi)滴加3%BSA?均勻覆蓋組織，室溫封閉30min。13.?加一抗：輕輕甩掉封閉液，在切片上滴加按一定比例配好的一抗，切片平放于濕盒4°過夜孵育。14.?加二抗：玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。切片稍甩干后在圈內(nèi)滴加與超敏兔鼠通用二抗（HRP標記）覆蓋組織，室溫孵育50min。15.?DAB顯色：玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。切片稍甩干后在圈內(nèi)滴加（稀釋液和濃縮液1000:50配制）新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下控制顯色時間，陽性為棕黃色，純水沖洗切片終止顯色。16.?復染細胞核：蘇木素染色2-3mins左右，自來水洗，蘇木素分化液分化2秒，自來水沖洗，蘇木素返藍液返藍15-30s，流水沖洗。17.?脫水封片：將切片依次放入75%酒精5min-85%酒精5min -95%酒精5min -無水乙醇5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min 中脫水透明，將切片從二甲苯拿出來稍晾干，中性樹膠封片。18.?顯微鏡鏡檢，圖像采集分析。結果判讀：蘇木素染出細胞核為藍色，DAB顯出的陽性表達為棕黃色，紅色顯色試劑呈粉紅色注意事項：1．注意切片脫蠟是否徹底；2．實驗過程中切片勿干片；3. ? 實驗操作中小心槍頭掛傷組織。 無 暫無 說明文檔下載說明書.pdf 上一篇: IF+TUNEL雙染下一篇: IHC+普魯士藍（或其他化學染料） 推薦 細胞使用費 2024年11月28日 3192 【產(chǎn)品信息】 無 暫無 查看全文 油紅O掃描 2024年9月5日 1775 服務介紹： 數(shù)字切片掃描是將物質(zhì)化的玻片標本快速數(shù)字化的過程，能高效、高清晰、全信息的圖像采集，是真正脫離顯微鏡的閱片方式。能... 查看全文 DAB加強法普魯士藍 2023年7月6日 1071 【產(chǎn)品信息】 無 暫無 查看全文 組織芯片切片 2024年4月17日 1499 項目介紹 組織芯片 (tissue chip)，也稱組織微陣列 (tissue microarrays)。是將許多不同個體組織標本以規(guī)則微陣列方式排布于同一載玻片... 查看全文
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