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免疫熒光（單標）
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免疫熒光（單標）

免疫熒光（單標）

  • 價格￥55
  • 單位張
  • 貨號HKF2005
  • 品牌浩克

產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品參數(shù)
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【產(chǎn)品信息】

產(chǎn)品名稱產(chǎn)品貨號規(guī)格價格
免疫熒光（單標）HKF2005張55元

石蠟切片免疫熒光實驗報告

一、實驗器材及試劑

  1. 實驗器材
名稱廠家型號
脫水機湖北貝諾醫(yī)療科技有限公司JT-12S
生物組織自動包埋機湖北貝諾醫(yī)療科技有限公司JB-L5
轉(zhuǎn)輪式切片機徠卡顯微系統(tǒng)上海有限公司HistoCoreBIOCUT
石蠟包埋機（冷臺）湖北貝諾醫(yī)療科技有限公司JB-L5
KD-P組織攤片機浙江金華科迪儀器設(shè)備有限公司51A011
烤箱天津市萊玻特瑞儀器設(shè)備有限公司GFL125
載玻片及蓋玻片江蘇匯達醫(yī)療器械有限公司710510    
微波爐美的M1-L213B
脫色搖床上海琪特分析儀器有限公司STS-3
渦旋儀秒生科技有限公司SI-A256
移液槍DragonKE003068
組化筆Gene techGT1001
熒光顯微鏡NIKONECLIPSE C1
  • 主要實驗試劑
試劑廠家貨號
無水乙醇杭州宏達化工儀器有限公司SJ003614
二甲苯國藥集團化學(xué)試劑有限公司10023418
20xTRIS-EDTA修復(fù)液（PH8.0）杭州浩克生物技術(shù)有限公司HKI0003
PBS緩沖液杭州浩克生物技術(shù)有限公司 
BSA杭州浩克生物技術(shù)有限公司HK5021
一抗：xxx綠  
二抗：HRP超敏山羊抗兔鼠通用二抗杭州浩克生物技術(shù)有限公司HKI0029
Flare520綠杭州浩克生物技術(shù)有限公司HKI0014
DAPI（即用型）杭州浩克生物技術(shù)有限公司HKI0005
抗熒光淬滅封片劑杭州浩克生物技術(shù)有限公司HKI0007-1
  • 石蠟切片免疫熒光實驗步驟
  • 石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ12min-二甲苯Ⅱ12min-無水乙醇Ⅰ6min- 95%酒精6min-85%酒精6min-蒸餾水洗。
  • 抗原修復(fù)：組織切片置于盛滿EDTA修復(fù)液（PH8.0）的修復(fù)盒中于微波爐內(nèi)進行抗原修復(fù)，中火8min?；?min中低火7min，此過程中應(yīng)防止緩沖液過度蒸發(fā)，切勿干片。自然冷卻后將玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。
  • 阻斷內(nèi)源性過氧化物酶：切片加上3%的雙氧水，室溫孵育25min，將玻片置PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。
  • 血清封閉:切片稍甩干后用組化筆在組織周圍畫圈（防止抗體流走），在組化圈內(nèi)滴加3%BSA 均勻覆蓋組織，室溫封閉30min。
  • 加一抗：切片稍甩干后在圈內(nèi)滴加按一定比例稀的抗體覆蓋組織。切片平放于濕盒內(nèi)4°C孵育過夜。
  • 加二抗：玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。切片稍甩干后在圈內(nèi)滴加與一抗相應(yīng)種屬的二抗覆蓋組織，避光室溫孵育50min。
  • 信號放大:將玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min 。滴加相對應(yīng)顏色Flare信號放大試劑，3-5min.將玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min 。
  • DAPI復(fù)染細胞核：玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。切片稍甩干后在圈內(nèi)滴加DAPI染液，避光室溫孵育10min。
  • 封片：玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。切片稍甩干后用抗熒光淬滅封片劑封片。
  • 鏡檢拍照：切片于尼康倒置熒光顯微鏡下觀察并采集圖像，根據(jù)對應(yīng)波長選擇相應(yīng)通道。
Flare染料激發(fā)波長發(fā)射波長
DAPI 藍色350420
Flare480青綠450480
Flare520綠490520
Flare570紅550570
Flare620橙590620
Flare690粉630690

無

暫無

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