簡介:在細(xì)胞凋亡時,內(nèi)源性Mg、Ca依賴性核酸內(nèi)切酶被激活,切割細(xì)胞DNA,使其成核小體間DNA鏈的斷裂、大分子DNA鏈的斷裂及DNA單鏈的斷裂。其中以核小體之間DNA斷裂時最多見的一種斷裂方式,斷裂形成的DNA長度為核小體DNA長度的整數(shù)倍,即180~200bp的整數(shù)倍。通過提取凋亡細(xì)胞的基因組DNA在1.5~2%瓊脂糖凝膠電泳,紫外燈下觀察可見到特征性的“梯狀”(ladder)DNA條帶。此稱DNA LADDER實驗。而壞死的細(xì)胞DNA則成模糊的彌散條帶。用于定性、定量檢測細(xì)胞凋亡。
實驗步驟:樣本處理-提取DNA-瓊脂糖凝膠電泳-分析結(jié)果出報告
實驗周期:7個工作日
實驗要求:
1、動物組織: 100mg(黃豆大小),最少50mg(綠豆大小),脂肪組織,結(jié)締組織,纖維化組織適當(dāng)增加,干冰運輸。
2、細(xì)胞:1×10^6個細(xì)胞,貼壁細(xì)胞舒展,未變圓,干冰運輸;
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