簡(jiǎn)介:在細(xì)胞凋亡時(shí),內(nèi)源性Mg、Ca依賴(lài)性核酸內(nèi)切酶被激活,切割細(xì)胞DNA,使其成核小體間DNA鏈的斷裂、大分子DNA鏈的斷裂及DNA單鏈的斷裂。其中以核小體之間DNA斷裂時(shí)最多見(jiàn)的一種斷裂方式,斷裂形成的DNA長(zhǎng)度為核小體DNA長(zhǎng)度的整數(shù)倍,即180~200bp的整數(shù)倍。通過(guò)提取凋亡細(xì)胞的基因組DNA在1.5~2%瓊脂糖凝膠電泳,紫外燈下觀察可見(jiàn)到特征性的“梯狀”(ladder)DNA條帶。此稱(chēng)DNA LADDER實(shí)驗(yàn)。而壞死的細(xì)胞DNA則成模糊的彌散條帶。用于定性、定量檢測(cè)細(xì)胞凋亡。
實(shí)驗(yàn)步驟:樣本處理-提取DNA-瓊脂糖凝膠電泳-分析結(jié)果出報(bào)告
實(shí)驗(yàn)周期:7個(gè)工作日
實(shí)驗(yàn)要求:
1、動(dòng)物組織: 100mg(黃豆大小),最少50mg(綠豆大小),脂肪組織,結(jié)締組織,纖維化組織適當(dāng)增加,干冰運(yùn)輸。
2、細(xì)胞:1×10^6個(gè)細(xì)胞,貼壁細(xì)胞舒展,未變圓,干冰運(yùn)輸;
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