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組織自發(fā)熒光淬滅劑

組織自發(fā)熒光淬滅劑

  • 價格¥100
  • 規(guī)格5ml*2
  • 貨號HKI0041
  • 單位
  • 品牌HaoKebio

產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品參數(shù)
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產(chǎn)品目錄產(chǎn)品組成產(chǎn)品規(guī)格
HKI0041-1組織自發(fā)熒光淬滅劑A5mL
HKI0041-2組織自發(fā)熒光淬滅劑5mL

【產(chǎn)品簡介】

免疫熒光技術(shù)利用熒光分子標(biāo)記的抗體對與之結(jié)合的抗原進(jìn)行定位,實現(xiàn)對蛋白質(zhì)、聚糖蛋白、小生物分子及非生物分子等進(jìn)行亞細(xì)胞可視化觀察。在此過程中,組織中的自發(fā)熒光往往會嚴(yán)重干擾觀察。自發(fā)熒光是在免疫熒光檢測過程中產(chǎn)生的與目的信號無關(guān)的背景熒光信號的統(tǒng)稱,其產(chǎn)生的原因主要來自于組織本身的組分,例如黃素、卟啉、植物葉綠素、膠原蛋白、彈性蛋白、紅細(xì)胞、脂褐素等都會產(chǎn)生較強的自發(fā)熒光,顯著影響免疫熒光實驗的信噪比。此外組織固定中使用的福爾馬林、多聚甲醛等物質(zhì)也會產(chǎn)生大量的自發(fā)熒光。
本產(chǎn)品可有效減少組織自發(fā)熒光,提高免疫熒光檢測的信噪比。其中
A 液有效成分為二價銅離子,可有效減少紅細(xì)胞的自發(fā)熒光,B 液有效成分為蘇丹黑,能顯著降低脂褐素引起的自發(fā)熒光。

【儲存與運輸】
常溫運輸與保存;有效期12 個月。
【使用方法】
1. 免疫標(biāo)記前的自發(fā)熒光淬滅:組織切片在經(jīng)過抗原修復(fù)以后,用組化筆畫圈圈出組織,然后滴加組織自發(fā)熒光淬滅劑 A 液覆蓋組織室溫孵育 30 min,純水洗 5 min。
2. 組織切片進(jìn)行常規(guī)的封閉、一抗孵育、二抗孵育、DAPI 復(fù)染細(xì)胞核等免疫熒光檢測步驟。
3. 免疫標(biāo)記后的自發(fā)熒光淬滅:滴加組織自發(fā)熒光淬滅劑 B 液覆蓋組織室溫避光孵育 5 min,流水沖洗3 min。
4. 封片:玻片置于 PBS 中晃動洗滌(可置于脫色搖床上)3 次,每次 5 min。切片稍甩干后封片,鏡檢。

【注意事項】
1.不同樣本其自發(fā)熒光原理不同,使用組織自發(fā)熒光淬滅劑的效果可能會有差異。
2.組織自發(fā)熒光淬滅劑A 液是和雙氧水連著用,會對 DAPI 著色有影響,如果做 TSA 實驗,不建議加組織自發(fā)熒光淬滅劑 A 液。
3.加入組織自發(fā)熒光淬滅劑B 液后組織會染成深藍(lán)色,但是不會影響熒光拍照。
4.切片經(jīng)B 液孵育完以后可以用水或者 PBS 洗滌,但不能用含吐溫的溶液洗滌,否則 B 液被過度洗去影響背景熒光淬滅效果。
5.組織自發(fā)熒光淬滅劑B 液每次用完后務(wù)必將瓶蓋擰緊,防止溶劑揮發(fā)。
6.若B 液孵育后組織上有雜質(zhì)沖不干凈,可用 70%乙醇將 B 液稀釋一倍后使用。
7.操作時請穿實驗服,并佩戴一次性手套。

暫無

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