胼胝質染色
1251實驗流程: 脫蠟至水—胼胝質染色—苯胺藍法染色—脫水封片—顯微鏡鏡檢 送樣運輸要求: 1.樣本放置于20倍樣本體積的固定液中固定24h...
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試劑盒:以實際試劑盒品牌為準
實驗流程(具體步驟以說明書為準):
1.樣本準備:血清、血漿、組織勻漿、細胞上清;
2.操作步驟:處理樣本配制標準品—加樣(標準品及樣本)—洗板,加檢測抗體溶液,孵育—洗板,加酶溶液,孵育— 洗板,加TMB底物— 加終止液50ul,立即450nm讀數(shù)(雙抗夾心法)
處理樣本配制標準品—加樣(標準品及樣本)—加檢測抗體-加酶溶液— 混勻孵育— 洗板,加TMB顯色— 加終止液50ul,立即450nm讀數(shù)(競爭法)
3.實驗結果:有樣本OD值代入標曲中計算出濃度,結果以EXCEL形式發(fā)出。
送樣運輸要求:
1、動植物組織樣本(干冰運輸)
準確稱取動物組織重量按重量(mg):體積(ul)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(推薦0.86%或0.9%的生理鹽水),冰水浴條件下,機械勻漿,制備成10%的勻漿液,2500~3000轉/分鐘,離心10分鐘,取上清液進行測定。
2、血清樣本(干冰運輸)
全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜(GLU檢測請勿全血樣本放置過夜取血清)后于2-8℃ 3000轉/分離心15min,取上清即可立即檢測;或進行分裝,并將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。解凍后的樣本應再次離心,然后檢測。
3、血漿樣本(干冰運輸)
可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2-8℃3000轉/分離心15min,取上清即可立即檢測;或進行分裝,并將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。解凍后的樣本應再次離心,然后檢測。
4、細胞樣本
貼壁細胞:將細胞用PBS沖洗2次后,用細胞刮將細胞小心刮下來,將培養(yǎng)液3000轉/分,離心10min。棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。
懸浮細胞:將培養(yǎng)液3000轉/分,離心10min。棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。
細胞上清:標本于2-8℃,3000轉/分離心15min取上清,上清立即用于實驗,或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復凍融。
僅供科研用途,不可用于臨床診斷!