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免疫熒光雙標掃描(芯片)

免疫熒光雙標掃描(芯片)

  • 價格¥1500
  • 單位
  • 貨號HKF4023
  • 品牌浩克

產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品參數(shù)
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【產(chǎn)品信息】

組織芯片免疫熒光染色,是將許多不同處理的組織以規(guī)則的微陣列方式排列于同一載體上,同時進行相同指標的免疫熒光檢測。

產(chǎn)品名稱產(chǎn)品貨號規(guī)格價格
免疫熒光雙標掃描(芯片)HKF40231500元

實驗流程:
1. 石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入環(huán)保型脫蠟液10min-環(huán)保型脫蠟液10min-環(huán)保型脫蠟液10min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-無水乙醇Ⅲ5min-蒸餾水洗。
2. 抗原修復:組織切片置于盛滿EDTA抗原修復緩沖液(PH8.0)的修復盒中于微波爐內(nèi)進行抗原修復。中火8min停火8min轉(zhuǎn)中低火7min,此過程中應防止緩沖液過度蒸發(fā),切勿干片。自然冷卻后將玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。(修復液和修復條件根據(jù)組織來確定)
3. 畫圈:切片稍甩干后用組化筆在組織周圍畫圈(防止抗體流走)
4. 血清封閉:在圈內(nèi)滴加BSA孵育30min。(一抗若是山羊來源,則加驢血清)
5. 加第一抗:輕輕甩掉封閉液,在切片上滴加PBS按一定比例配好的一抗,切片平放于濕盒內(nèi)4°C孵育過夜。(濕盒內(nèi)加少量水防止抗體蒸發(fā))
6. 加二抗:玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。切片稍甩干后在圈內(nèi)滴加與一抗相應種屬標記的按一定比例配好的二抗覆蓋組織,室溫孵育50min。
7. DAPI復染細胞核:切片稍甩干后在圈內(nèi)滴加DAPI染液,避光室溫孵育10min。
8. 自發(fā)熒光淬滅:切片稍甩干后,在圈內(nèi)加入自發(fā)熒光淬滅劑5min,流水沖洗10min。
9. 封片:玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。切片稍甩干后用抗熒光淬滅封片劑封片。
10.鏡檢拍照:切片置于掃描儀下采集圖像或熒光顯微鏡下拍照。(DAPI紫外激發(fā)波長330-380nm,發(fā)射波長420nm,發(fā)藍光;FITC激發(fā)波長465-495nm,發(fā)射波長515-555 nm,發(fā)綠光;CY3激發(fā)波長510-560,發(fā)射波長590nm,發(fā)紅光. CY5激發(fā)波長 608-648nm, 發(fā)射波長672-712。 DAPI染出來的細胞核在紫外的激發(fā)下為藍色,陽性表達為相應熒光素標記的紅光,綠光 。

送樣運輸要求:

  1.組織樣本放置于20倍樣本體積的固定液中固定24h以上,常溫運輸送樣。

  2.石蠟切片常溫保存運輸。

僅供科研用途,不可用于臨床診斷!

暫無

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