【產(chǎn)品簡介】
免疫顯色試劑是二步法免疫組化試劑盒,適合與兔或鼠源一抗配用。其主要過程為,一抗 與切片中的靶抗原形成抗原抗體復(fù)合物,酶標(biāo)羊抗鼠/兔 IgG 聚合物與抗原抗體復(fù)合物中的一抗 結(jié)合,再利用辣根過氧化物酶催化二氨基聯(lián)苯胺 (DAB) 在抗原部位形成棕色顯色。由于該系統(tǒng) 不含生物素和鏈親和素,所以不受內(nèi)源性生物素干擾,染色背景非常清晰。
【產(chǎn)品組成 】
產(chǎn)品組分 | 200T | 500T |
試劑 A | 0.25mL | 1mL | 5mL |
試劑 B | 10mL | 20mL | 100mL |
【儲(chǔ)存與運(yùn)輸】
本試劑需低溫運(yùn)輸,貯存于 4℃低溫環(huán)境,有效期一年
【使用方法】
常規(guī)脫蠟水化:
石蠟切片經(jīng)常規(guī)脫蠟和水化。
抗原熱修復(fù):
參照一抗說明書進(jìn)行抗原修復(fù)。
DAB 工作液的配制:
按每毫升 DAB 緩沖液 (試劑 B) 中加入 50 μL DAB 色原 (試劑 A) (約 1 滴) 的比例配制 DAB 工作液,DAB 工作液應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用。配制好的 DAB 工作液需在 2 小時(shí)內(nèi)使用,如出現(xiàn)沉淀, 使用前先混勻。
操作步驟:
1) 抗原修復(fù)完畢后自然冷卻的切片,用自來水清洗。
2) 除去切片上組織周圍的液體,用免疫組化筆圈定玻片上的待測組織區(qū)域并放入 PBST 緩 沖液中。
3) 取出切片,除去 PBST 緩沖液,滴加內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑 (視切片大小以完全覆蓋 切片組織為宜) ,于組織上孵育 10 分鐘,用 PBST 清洗切片。
4)除去 PBST 緩沖液,滴加 100μL 左右一抗工作液(視切片大小以完全覆蓋切片組織為宜), 于組織上進(jìn)行孵育 (按照各自一抗說明書操作) 。一抗孵育完畢,用 PBST 清洗切片。
5) 除去 PBST 緩沖液,每張切片加酶標(biāo)羊抗鼠/兔 IgG 聚合物 100μL 左右 (視切片大小以 完全覆蓋切片組織為宜) ,室溫下孵育 30 分鐘。PBST 緩沖液清洗切片。
6) 用預(yù)備好的 DAB 工作液進(jìn)行顯色,每張切片加 100μL 左右 DAB 工作液 (視切片大小以 完全覆蓋切片組織為宜) ,顯色時(shí)間為 1-5 分鐘 (鏡檢控制染色) ,用自來水沖洗終止顯色反 應(yīng)。
7) 需要時(shí),使用蘇木素染液復(fù)染。
8) 切片經(jīng)過脫水,透明,封片。
注:若將本試劑應(yīng)用于自動(dòng)檢測平臺(tái),需根據(jù)實(shí)際情況確認(rèn)使用條件。
【注意事項(xiàng)】
1.本免疫顯色試劑僅用于體外診斷,不作其他用途。
2.開始實(shí)驗(yàn)前,應(yīng)仔細(xì)閱讀此說明書。
3.請(qǐng)?jiān)谠噭┖杏行趦?nèi)使用。
4.本免疫顯色試劑僅限有專業(yè)經(jīng)驗(yàn)或經(jīng)專業(yè)培訓(xùn)的人員使用。
5.操作時(shí)請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服,并佩戴一次性手套。
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