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產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品參數(shù)
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【產(chǎn)品信息】
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品貨號 | 規(guī)格 | 價格 |
ROS染色 | HKF2029 | 張 | 45元 |
冰凍切片ros實(shí)驗(yàn)步驟
1、 冰凍切片固定:冰凍切片從冰箱拿出來復(fù)溫,晾干水分,純甲醇固定10min,待純甲醇稍干后置于烤箱5min,然后置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。
2、 染色:冰凍切片稍甩干后用組化筆在組織周圍畫圈(防止抗體流走),在圈內(nèi)滴加ROS染液濃度1:1000(濃度可根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果調(diào)整),避光恒溫箱37°孵育30min。
3、 DAPI復(fù)染細(xì)胞核:玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。切片稍甩干后在圈內(nèi)滴加
DAPI染液,避光室溫孵育10min。
4、 封片:玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。切片稍甩干后用抗熒光淬滅封片劑封片。
5、 鏡檢拍照:切片于尼康倒置熒光顯微鏡下觀察并采集圖像。

| 激發(fā)波長 | 發(fā)射波長 |
紫外 | 330-380nm | 420nm |
FITC綠光 | 465-495nm | 515-555 nm |
CY3紅光 | 510-560 | 590nm |
冰凍切片免疫熒光實(shí)驗(yàn)結(jié)果判讀
DAPI染出來的細(xì)胞核在紫外的激發(fā)下為藍(lán)色,陽性表達(dá)為相應(yīng)熒光素標(biāo)記的紅光
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