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細(xì)胞EdU檢測

細(xì)胞EdU檢測

  • 價格¥450
  • 單位
  • 貨號HKF6007
  • 品牌浩克

產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品參數(shù)
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服務(wù)介紹:

貨號名稱規(guī)格價格
HKF6007細(xì)胞EdU檢測450元

服務(wù)介紹:

EdU(5-Ethynyl-2’- deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細(xì)胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復(fù)制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo?熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測細(xì)胞DNA復(fù)制活性,適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面。

實驗流程:

1 每孔加入100μL滲透劑(0.5% TritonX-100的PBS)脫色搖床孵育10分鐘;PBS清洗1次,5分鐘。

2每孔加入100 μL的EDU染色反應(yīng)液(配置比例見下表),避光、室溫、脫色搖床孵育30分鐘后,棄染色反應(yīng)液;

3染核:爬片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上避光晃動洗滌3次,每次5min。切片稍甩干后滴加dapi染液,或hochest染液室溫避光染核10min。

4封片:爬片用PBS(PH7.4)洗滌3次,每次5min。爬片稍甩干后將有細(xì)胞的一面朝下用抗熒光淬滅封片劑將玻片封固在載玻片上封片。

5 鏡檢拍照:切片于尼康正置熒光顯微鏡下觀察并采集圖像。(紫外激發(fā)波長330-380nm,發(fā)射波長420nm;FITC綠光激發(fā)波長465-495nm,發(fā)射波長515-555 nm;555紅光激發(fā)波長550nm,發(fā)射波長590nm)

結(jié)果判讀

DAPI染出來的細(xì)胞核在紫外的激發(fā)下為藍(lán)色,陽性表達(dá)為相應(yīng)熒光素標(biāo)記的紅光或者綠光 

送樣運輸要求:

  1.組織樣本放置于20倍樣本體積的固定液中固定24h以上,常溫運輸送樣。

  2.石蠟切片常溫保存運輸

  3.冰凍切片-20℃保存運輸

  4.細(xì)胞爬片PFA固定15min后用無菌PBS洗滌后用無菌PBS浸泡,4℃冰袋保存運輸?shù)綄嶒炇摇?/p>

注意事項

1.檢測之前需動物活體注射化學(xué)試劑EdU,細(xì)胞需用化學(xué)試劑EdU處理造模,否則無陽性。

僅供科研用途,不可用于臨床診斷!

暫無

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